1、场地空间
细胞培养室与其它理科实验室最大的不同,在于其具有生物屏蔽区,也就是说细胞培养室有一个地方可以按照研究者的意愿,能够实现决定该区域有生命现象或者只有一种特定的生命体,也就是细胞培养室里特定的地方只能存在一种希望的生命体,主要是细胞形式的,否则,就不是细胞培养室。该区域均分别用玻璃和铝合金框架分隔,吊顶封闭但不压抑,由相应的门、洞相通,并安置紫外消毒灯,以便于进行日常无菌环境维护。该区域的面积由超净台的数量和大小相应调整,太大浪费空间,太小不方便。安装有空调和过滤通风设备。除此之外,还应该有一个普通的生物实验空间。普通细胞培养室的空间,一般来说40 m2左右可以满足需要。总的原则是布局合理,方便操作。
(1)无菌区。对于普通细胞培养室,无菌区是整个细胞生长过程的无菌环境、细胞培养剂、细胞培养瓶和一定时间内无菌的超净台,由于前3个无菌区可以移动而且空间小,因此,无菌区的空间主要取决于净化台的数量和大小。
(2)净化区。围绕着超净台,需要一个相对干净的环境,也就是细菌少,灰尘少。空气中的微生物越少,细胞培养就不易被污染。空气中灰尘会成为细菌的运载工具,而且灰尘会堵塞无菌过滤系统,影响无菌效果和仪器的使用寿命。这个范围是研究工作者操作细胞的活动空间,大小围绕净化台1 m左右范围。
(3)缓冲区。作为消毒物品存放和隔离带,研究者的工作服与工作鞋可以在这个地方换用,以便于减少研究者从外面带进来的细菌和灰尘。
(4)普通区。是作为细胞培养体系的支撑系统,类似于普通生物实验室,除了仪器设备外,还有相应的固定台面,用于放置仪器设备和简单的细胞培养有菌操作实验,当然,实验室还有基本的供水、供电,以及生物废水排放系统。还要考虑通风和采光。
细胞实验室仪器配置
随着技术的进步和相关领域研究的不断深入,细胞培养装置得到了充分的发展,用于研究和生产的细胞培养装置已经发展成系统、成规模[5]。对于普通细胞实验室的建设,配置仪器非常关键,以简单实用为基本原则,太多、太贵经费不允许,空间有限,也没这个必要。必须的设备如下:
(1)细胞培养箱。细胞培养箱是细胞生长的大环境,保障为细胞提供37℃、5%二氧化碳、饱和湿度的恒定条件。一般配备2台,用三通管与二氧化碳钢瓶相连,2台是为防备仪器出故障时的保证细胞有生长的环境。当然,二氧化碳钢瓶要3个:①便于公司送气,②使用,③实验室预备。
(2)超净台。这是细胞培养室用于研究者直接操作细胞的狭小空间。一般说来,具有生物安全功能的2台超净台,足够装备普通细胞培养室,1台全排,用于细胞的化学物理处理等操作,1台半排用于一般细胞培养操作。这样的配置是需要的,细菌超净台则不适合细胞培养,忽视了对研究者的保护,与科学发展不相适应。超净台内通常配置酒精灯、试剂架、镊子、消毒棉球、火柴等用品。
(3)倒置显微镜。用于观察细胞的生长状态。目前产品中,以品牌设备为首选,镜下真实的反映细胞的生长情况,而且视野开阔,经久耐用。
(4)离心机。在组织分离和细胞操作中,经常会用到的设备,不要求太高,普通产品均能满足需要。一般来说,离心体积到达100 ml,离心力400既可。可以与其他实验室共用。
(5)冰箱。保存生物试剂等,普通冰箱可以配置2台,超低温冰箱1台,均要带锁,带锁的作用是为了便于管理。
(6)液氮罐。用于长期保存细胞,最好是品牌产品,至少2个。
3、消毒和洗涤设施
一般的生命科学实验室都有,不需要专门为某一个功能性实验室单独配置,细胞培养室经常会用到,因此,细胞培养室尽量不要离开太远,减少耗材消毒处理往返无意义时间消耗。细胞培养室的屏蔽区除了超净台,其他的设备均安置在普通区,按照房间结构和屏蔽区位置,合理安排必须设备,如果空间紧张,可以把超低温冰箱和液氮罐安置在其他房间。其实,仪器的安置跟家庭安放家具很相似,既整齐美观又舒适方便。实验室区域在规划上要做到合理布局,人物分流,设备布置井然有序。